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细胞周期检测

细胞周期是指细胞从一次破碎完成最先到下一次破碎竣事所履历的全历程。细胞周期由多个阶段组成，通常包括G1期（DNA合成前期，细胞体积显著增大）、S期（DNA合成期，包括卵白合成 ）、G2期（DNA合成后期，大宗合成RNA和卵白质）、M期（有丝破碎和细胞破碎）以及GO期（细胞静息休眠或执行生物学功效）。在细胞周期的差别时期，细胞核内的DNA含量保存差别。使用染料对DNA举行染色（如PI染料），可凭证其荧光强度判断细胞所处时期。

细胞凋亡检测

细胞凋亡是指为维持内情形稳固，由基因控制的细胞自主的有序的殒命。AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂团结卵白，能够与（磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS）团结，磷脂酰丝氨酸主要漫衍在细胞膜内侧，在细胞爆发凋亡的早期，差别类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞外貌，即细胞膜外侧，因此荧光标记的Annexin V可用于检测袒露于早期凋亡细胞外部的PS。Annexin V还可以染坏死细胞，由于这些细胞的膜破碎，使Annexin V可以进入整个质膜，可是Annexin V就无法区分坏细胞死（中晚期凋亡细胞）和早期凋亡细胞。因此，通过与碘化丙啶（PI）共染色，可以将凋亡细胞与坏死细胞（中晚期凋亡细胞）区脱离，由于早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整，PI能进入坏死细胞（中晚期凋亡细胞），可是被早期凋亡细胞扫除在外。

左上象限Q1：此区域为坏死细胞。包括细胞碎片和机械损伤的细胞

右上象限Q2：此区域为晚期凋亡细胞

右下象限Q3：此区域为早期凋亡细胞

左下象限Q4：此区域为活细胞

细胞克隆形成试验

细胞克隆形成实验是用来检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性等项目的主要手艺要领。单个细胞在体外一连6代以上，其子女所组成的细胞群称为克隆或集落，通过计数克隆形成率，可对单个细胞的增殖潜力做定量剖析，克隆形成率是反应细胞群体依赖性和增值能力的两个主要性状。

克隆凭证作育介质差别分为平板克隆和软琼脂克隆，其中平板克隆形成实验主要适用于贴壁生长的细胞，软琼脂克隆形成实验常用于悬浮生长的细胞。

Control group                  Target group

细胞迁徙试验

细胞划痕法是简捷测定细胞迁徙运动和修复能力的要领，类似体外伤口愈合模子，在体外作育皿或平板作育的单层贴壁细胞上，用微量枪头或其它硬物在细胞生长的*区域划线，去除*部分细胞，然后继续作育细胞至试验设准时间，视察周边细胞是否迁徙至*划痕区，以此判断细胞的生长迁徙能力。试验通常需设定比照组和供试品组，通过差别分组之间的细胞关于划痕区修复能力的差别来盘算迁徙率可以判断供试品迁徙与修复能力。

比照组（牛I型胶原卵白）：0h-24h-48h-72

实验组（人重组胶原卵白）：0h-24h-48h-72h

细胞毒性试验

在电子耦合试剂保存时，WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐），可以被线粒体内的脱氢酶还原天生高度水溶性的橙黄色的甲臜产品（formazan），其颜色的深浅与细胞增殖成正比，与细胞毒性成反比，对同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。使用酶标仪在450nm波优点测定OD值，可以间接反应活细胞的数目。用该要领可以准确快速判断出供试品对目的细胞的半数致死量。

正常细胞                                           病变细胞(CPE)                            毒性细胞

由回归方程 y=-10.02ln(x)+95.21 可得，当供试品能对一半细胞爆发毒性，即 y=50%时，此时 x=91.05μg/mL。